成交量 PCR（聚合酶链反应）是一种分子生物学技术，用于扩增特定 DNA 序列。它是一种非常强大的技术，可用于各种应用，包括诊断、研究和法医学。

工作原理

成交量 PCR 通过一个称为热循环的过程进行，该过程包含三个步骤：

1. 变性： DNA 样品被加热到 95°C，这会破坏 DNA 双链并使它们变性为单链。
2. 退火：温度降至较低的温度（通常为 50-65°C），这允许特定的引物与互补的 DNA 序列结合。引物是短的 DNA 片段，它们与目标 DNA 序列的端部互补。
3. 延伸：温度升高至 72°C，这允许一种称为 DNA 聚合酶的酶使用引物作为模板合成新的 DNA 链，从而扩增目标 DNA 序列。

热循环过程重复 30-40 次，每次都会指数增加目标 DNA 序列的拷贝数。

应用

成交量 PCR 具有广泛的应用，包括：

• 诊断：检测传染源（如病毒和细菌）、遗传疾病和癌症。
• 研究：研究基因表达、突变和进化。
• 法医学：分析 DNA 样品以识别个人或确定亲属关系。
• 生物技术：生产合成 DNA、蛋白质和生物制品。

优点和缺点

优点：

• 灵敏度：成交量 PCR 可以检测极少量的 DNA 样品。
• 特异性：引物被设计为与目标 DNA 序列特异性结合，从而确保扩增的准确性。
• 自动化：成交量 PCR 可以自动化，使其成为大规模检测的高通量技术。

缺点：

• 污染：成交量 PCR 极易受到污染，可能导致假阳性结果。
• 成本：成交量 PCR 涉及专门的仪器和试剂，这使其成本相对较高。
• 假阳性/假阴性：如果引物设计不当或 PCR 条件不优化，可能会产生假阳性或假阴性结果。